前言
由于小鼠与人类在解剖学、生理学,药理学方面的相似性,小鼠被广泛应用于高眼压模型和房水生成及流出通路调节机制的研究。此外,小鼠高眼压模型对于研究房水经小梁网流出的内环境稳定复杂性及高眼压功能障碍具有非常重要的意义。在本综述中,我们介绍小鼠开角型高眼压模型的最低可接受标准。希望这套标准有助于提高使用小鼠模型的科学严谨性。
青光眼是一组复杂的视神经病变,是全球不可逆失明的首要原因。眼内压(IOP)升高是原发性开角型青光眼(POAG)最常见的关键风险因素。尽管青光眼无法治愈,但前瞻性随机多中心研究提供了令人信服的证据,表明降低眼内压(IOP)的药物和/或手术干预可以减缓各种类型青光眼的疾病进展。本综述的目的是为科研人员提供开发和评估小鼠眼高压(OHT)模型的最低可接受标准,以及为开发和验证新的OHT小鼠模型提供指导。
研究结果
眼压测量
眼压(Intraocular Pressure) 的测量,有多种方法。TonoLab回弹式眼压计(iCare Finland, Vantaa, Finland) 是目前最常见、且侵入性最小的大小鼠眼压测量方法。此外,微针插管法(Microneedle Cannulation) 也可以测量准确眼压值。本文中,我们只介绍测量小鼠眼压的最佳方法-iCare TonoLab眼压计。TonoLab是专为啮齿动物研发的眼压计。TonoLab的准确性已经过充分的验证。但是,角膜和其他眼部特性的变化可能会影响测量结果,因此需要谨慎考虑不同小鼠品系或其他影响角膜生物力学特性的因素。
TonoLab 回弹式眼压计使用轻巧的探头接触角膜测量眼压,测量力度轻柔,无需角膜局部麻醉。由于与角膜的接触产生的冲击力很小,因此不需要局部角膜麻醉。这个过程可以在小鼠脱敏适应后进行,且对于熟练的用户来说,甚至可以每天进行多次。这里提到的“conscious mice”指的是清醒状态的小鼠,而不是处于麻醉或昏迷状态的小鼠。小鼠会逐渐适应实验人员对其进行的各种操作,如抓取等。一旦小鼠适应了这些操作,熟练的实验人员就可以多次、频繁地进行该过程。
TonoLab回弹式眼压计为手持式设备,也有一些科研人员使用夹具将小鼠固定在环形支架上测量,可以消除使用者在操作时产生的轻微移动,特别是在按下测量按钮时,从而得到更一致的测量结果并减少错误消息的出现。另外,保持探头处于水平(于地面的)位置是必要的。
总结:
• TonoLab回弹式眼压计是一种准确、非侵入性的工具,用于测量小鼠的眼内压(IOP)。
• 使用眼压计时,应尽量减少眼压计的移动,并确保探头的尖端保持水平,垂直于角膜中央。
• 需多次测量来获得TonoLab的IOP值。应至少取三个IOP值的平均值。
结论
共识推荐总结:
– 当引入新的高眼压(Ocular Hypertension, OHT)模型时,如果该模型声称具有影响传统房水流出通路的表型,那么必须对该模型的流出机制进行表征。
– 在测试药物、病毒等试剂对流出通路(即房水通过传统流出途径排出的能力)的影响时,如果条件允许,强烈建议进行配对实验,即同时以生理范围内的压力或流速对双眼进行灌注。
– 在分析房水流出通路的数据时,应该检查数据的正态性。
– 在分析房水流出通路时,流量与压力之间的关系(即线性或非线性)应当被量化。
– 在比较不同动物的数据时,确保所有动物在相似的条件下接受治疗和饲养。